在细胞培养的领域中，细胞通常被分为两类：贴壁细胞与悬浮细胞。贴壁细胞需依附于培养皿才能生长，而悬浮细胞则可以在液体培养基中自由移动和增殖。看似贴壁细胞才需关注培养皿表面的相容性以及是否需采用胶原蛋白、多聚赖氨酸（poly-L-lysine, PLL）等物质来增加附着力。然而，如果您认为悬浮细胞“永远不需要包被”，那可能会被它们轻盈的外表所误导。事实上，在一些关键实验操作中，悬浮细胞也可能需要短暂“靠岸”，更是依赖于包被表面的支持。今天，我们探讨悬浮细胞为何有时需要包被？如何进行包被，又是为谁服务？

悬浮细胞并非始终自由

在细胞培养的世界里，悬浮细胞并不是完全不附着的。在某些情况下，它们仍然需要依赖包被表面进行短期固定与操作。适当的处理能提高实验的稳定性和数据的可靠性。

多聚赖氨酸（PLL）包被的定义

多聚赖氨酸（poly-L-lysine, PLL）是一种合成的阳离子多肽，拥有丰富的氨基基团，整体带有强正电荷。因细胞膜通常带有负电，PLL可以通过静电吸附帮助细胞附着于表面。PLL广泛应用于初代神经元和干细胞等难以贴壁细胞的培养，以及组织切片或细胞爬片的染色固定和强化某些表面结合力。

悬浮细胞需要包被的常见场景

悬浮细胞在以下几种实验中可能需用到包被：

• 免疫荧光成像与免疫染色：悬浮细胞在普通培养皿中易在洗涤过程中丢失，使用PLL包被的玻片可增强成像稳定性。
• 电转染后细胞收集：电转后的悬浮细胞在恢复期较脆弱，在PLL包被的板底短暂培养有助于提高后续转染效率。
• 细胞富集或原位功能检测：如ELISPOT和某些代谢产物原位检测需保证细胞位置稳定，PLY或细胞外基质包被的固定方法亦常被使用。
• 低密度培养中的聚团问题：在低密度培养时，适当包被可减少细胞间漂浮的干扰。
• 外泌体/病毒收集实验中的细胞处理：为保持细胞开放的环境，轻度PLL包被可保持细胞的稳定性。

如何正确使用PLL包被

包被的目的是为试验提供支持，而不是让悬浮细胞像贴壁细胞那样长时间附着。大多数情况下，使用包被是为了：

• 在实验窗口期提供短期固定
• 提高操作效率与成像质量
• 增强细胞在某些实验平台上的一致性

长期的附着会影响细胞的状态及其生物特性，因此应根据实验目的合理设置处理时间与强度。

何时避免使用包被？

并非所有悬浮细胞实验都需包被，以下情况应避免使用：

• 长期培养的悬浮细胞，如293F细胞，不宜加包被。
• 需完全无附着状态的实验，如某些流式功能检测、抗体介导的细胞毒性测定等，包被可能影响结果的真实性。

总结

悬浮细胞也有“靠岸”的时刻。无论是为了成像、收集、固定还是维持操作的稳定性，合适的表面包被（如PLL）能在关键环节显著提升实验的成功率与数据质量。而环亚集团·AG88致力于提供高品质的细胞培养相关产品与服务，帮助科研工作者实现更高水平的实验，确保研究成果的可靠性。